紫外可見分光光度計的基本工作原理類似于紅外光譜儀。一定頻率的紫外可見光用于照射待分析的有機物質(zhì)，引起分子中價電子的轉(zhuǎn)變，其將被選擇性地吸收。作為波長函數(shù)吸收的一組光譜反映了樣品的特征。在紫外可見分光光度計范圍內(nèi)，對于特定波長，吸收程度與樣品中組分的濃度成比例，因此可以定性分析測量的光譜，并且可以基于吸收和已知濃度來比較測量的光譜標(biāo)準(zhǔn)、定量分析。
紫外可見分光光度計的用途
1.檢定物質(zhì)
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是較大吸收波長λ-max和摩爾吸收系數(shù)ε是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的較大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。
2.與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)*一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo) 準(zhǔn)譜圖對照進行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高，且測定條件要相同。
3.比較較大吸收波長吸收系數(shù)的一致性
4.純度檢驗
5.推測化合物的分子結(jié)構(gòu)
6.氫鍵強度的測定
實驗證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強度也不同，這可以利用紫外光譜來判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強度，以確定選擇哪一種溶劑。
7.絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定：
8.反應(yīng)動力學(xué)研究
9.在有機分析中的應(yīng)用
有機分析是一門研究有機化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué)，它是在有機化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。
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